日期:2023-07-27 点击: 172 次
在PCR实验室的管理中应尽量避免污染产生,如果不慎产生了污染也有对应的处理方法,博泰小编带大家了解关于PCR实验室污染的处理方法及注意事项有哪些。
一、PCR实验室检测被污染的方法
1、酶解酶可将长链的核酸分子降解成小片段。
2、高压变性:高压可以将核酸降解成20-30bp的小片段。
3、紫外照射:PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,延伸终止。
4、修饰:标记遗传物质,阻止聚合酶与核酸的结合,从而抑制DNA扩散。
5、酒精擦拭:将核酸沉淀,擦拭后保证污染表面污染得到一定程度的缓解。
二、PCR实验操作注意事项
1、操作时设立阴阳性对照和空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性。
2、使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染。
3、避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
4、操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度。
5、由于加样器容易受产物气溶胶或标本DNA的污染,最好使用可替换或高压处理的加样器。如没有至少PCR操作过程中加样器应该专用,不能交叉使用,尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区。
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