PCR实验室怎么防止污染

Pcr实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。那么在PCR实验室中怎么防止污染呢，博泰小编分析告诉大家。

生物实验大多数实验检测都是微观的，基于细胞，分子，蛋白水平，而这些微观样本对外界环境的影响灵敏，比方温度、ph值、酶解、损害等，在我们尽力呵护样本的生存环境的一起，污染也是需要留意的头等大事，要坚决防止环境中的“杂质”的乱入，包含样本污染，实剂仪器穿插污染、产品气溶胶污染等对实验成果的影响。

一、污染的来源

在很多的生物实验室，分子生物学检测办法如PCR因其高灵敏度、快速、操作方便等优势现已被广泛应用，不过正是由于它灵敏度极高，极微量的污染源都有或许导致检测成果的假阳性，所以对环境污染的操控也极为严厉。面对很多的污染源，比方样本穿插污染、实剂仪器穿插污染、克隆质粒污染、PCR扩增产品污染、还有极容易忽视的气溶胶污染，气溶胶是由固体或液体小质点涣散并悬浮在气体介质中构成的胶体涣散体系，在空气与液体面冲突时，比方在操作时比较剧烈地摇动反响管，开盖时、吸样时及污染进样枪的重复吸样都可构成气溶胶而污染。现在多数生物实验室，分子实验每天都在大规模进行，污染源现已无处不在，特异性的，非特异性的，同源的，非同源的，广泛分布在样本容器、实验室台面，实剂溶液中、仪器表面内管附着等等，你以为一般的整理就能解决这些污染源吗?

二、常见的防止污染的办法

合理的实验室分区

实验室内各作业区的实验用品，包含移液器等应专用。如有或许，应在装有紫外灯的层流式作业台（如生物安全柜、超净作业台）内，吸加PCR实剂，作业台内应放置PCR专业用的微量离心机、一次性手套、各量程的移液器和其他必须物品。

正确的实验操作

吸加PCR实剂和模板的操作应严厉按要求进行，吸样要慢，尽量一次性完结，忌屡次抽吸，以免穿插污染或发生气溶胶污染。实验的过程中应勤换手套，在进出不同区域或进行模板操作后，都应及时更换手套。装有PCR实剂的微量离心管在打开之前应先做瞬时离心（约10s），将管壁及管盖上的液体甩至管底部，然后削减污染手套或加样器的时机。开管动作要轻，以防管内液体溅出或构成气溶胶，造成污染。在一起进行多个PCR反响时，应制备主反响混合液，再分装至PCR反响管，zui后增加样品核酸模板，以削减单个增加操作繁琐造成的污染。

实验器具和实剂

实验室自己装备的实剂，如去离子水、缓冲液等，在运用之前均应高压灭菌或过滤除菌。分装PCR实剂，所有的PCR实剂都应小量分装，以削减重复取样次数，并置于-20℃保存，适当时，最好做到专人专用。别的，PCR实剂、PCR反响液应与样品及PCR产品分隔保存，不该放于同一冰盒或冰箱。所有吸头、反响管等应一次性运用，运用之前，都应通过高压处理。若条件答应，最好运用带滤器的枪头。各作业区内的移液器要有标识，应固定运用用途，不能穿插运用。

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