PCR实验室的原则与注意事项

PCR实验室是分子诊断的基础，也是进行PCR实验的必备场所。实验室的基本知识仍然是非常重要的一环。博泰小编带大家了解PCR实验室的原则与注意事项有哪些。

一、PCR实验室工作基本原则

1.进入各工作区域应当严格按照单一方向进行。

试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区。

2.各工作区域必须有明确的标记，不同工作区域内的设备、物品不得混用。

3.不同的工作区域使用不同的工作服。工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。

4.实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染。

5.工作结束后，必须立即对工作区进行清洁。工作区的实验台表面应当可耐受诸如次氯酸钠的化学物质的消毒清洁作用。实验台表面的紫外照射应当方便有效。

6.实验室的安全工作制度或安全标准操作程序，所有操作符合《实验室生物安全通用要求》。

二、Pcr实验室的注意事项

1、试剂储存和准备区

贮存试剂和用于标本制备的消耗品等材料应当直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过扩增检测区，试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区，应当保存在标本处理区。  

2、标本制备区

由于在样本混合、核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染，可通过在本区内设立正压条件，避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染，加入待测核酸后，必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在传染危险性的材料，必须在生物安全柜内开盖，并有明确的样本处理和灭活程序。

3、扩增区

为避免气溶胶所致的污染，应当尽量减少在本区内的走动。必须注意的是，所有经过检测的反应管不得在此区域打开。

4、扩增产物分析区

核酸扩增后产物的分析方法多种多样，如膜上或微孔板或芯片上探针杂交方法、Southern转移、核酸测序方法、质谱分析等。