日期:2023-02-21 点击: 324 次
PCR技术凭借特异性强、灵敏度高、对检测样品要求低、方便快捷等优点,广泛应用于各种临床诊断。PCR实验室是承载PCR技术应用的设施,实验室的合理设计才能确保检测结果的可靠性,博泰小编带大家了解PCR实验室平面布局相关知识。
一、PCR实验室平面布局要求
1、如果采用实时荧光PCR法,则扩增区和分析区可以合并为一个区。
2、如果样本在扩增之前需要粉碎处理,则需要增加一个区域用于样品的粉碎。
3、PCR实验室一般由试剂储备区、标本制备区、扩增区、扩增分析区4个区域组成。
4、如果采用全自动化PCR分析仪,则标本制备区、扩增区和分析区可以合并为一个区。
二、实验室功能与设备设计要点分析
1、试剂储备区
该区域主要完成试剂和主反应混合液的储存、配制和封装工作。所有运送到该区域的试剂和材料不应经过其他区域,试剂和原材料应在本区内储存和制备。本区域的气压应相对外界保持正压。该区域的设备主要是冰箱、天平、混匀器、低速离心机、加样器、可移动紫外灯等。
2、标本制备区
该区域的功能是样本的保存、核酸提取和贮存、样本加入扩增反应管和测定DNA的合成。样本应直接运送至该区并储存在本区内,不得经过其他区域。对于气流压力的控制,由于在本区内加样操作可能产生气溶胶,为避免气溶胶扩散出去对外界造成污染,本区应对外界保持负压;同时本区相对于扩增反应混合物配制和扩增区以及扩增产物分析区为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
3、扩增区
该区域的功能是DNA扩增和扩增片段的测定。此外,反应混合液制备成反应混合液和已制备的DNA模板的加入等也可在本区内进行。对于气流压力的控制,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。
4、分析区
该区域的功能是扩增产物的分析。该区域可能会用到某些可致基因突变的有毒物质,应特别注意实验人员的安全防护。对于气流压力的控制,该区域是PCR实验的最后一步,压力应为最低,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。
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